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紫外線傳感器如何測(cè)量蛋白質(zhì)的含量?


關(guān)鍵詞:物質(zhì),吸收,波長作者:佐威發(fā)布時(shí)間:2022-04-25瀏覽次數(shù):218

紫外可見分光光度法是在190~760nm波長范圍內(nèi)測(cè)定物質(zhì)的吸光度,用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測(cè)定的方法。當(dāng)光穿過被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),物質(zhì)對(duì)光的吸收程度隨光的波長不同而變化。因此,通過測(cè)定物質(zhì)在不同波長處的吸光度,并繪制其吸光度與波長的關(guān)系圖即得被測(cè)物質(zhì)的吸收光譜。從吸收光譜中,可以確定最大吸收波長λmax和最小吸收波長λmin。物質(zhì)的吸收光譜具有與其結(jié)構(gòu)相關(guān)的特征性。因此,可以通過特定波長范圍內(nèi)樣品的光譜與對(duì)照光譜或?qū)φ掌饭庾V的比較,或通過確定最大吸收波長,或通過測(cè)量兩個(gè)特定波長處的吸收比值而鑒別物質(zhì)。用于定量時(shí),在最大吸收波長處測(cè)量一定濃度樣品溶液的吸光度,并與一定濃度的對(duì)照溶液的吸光度進(jìn)行比較或采用吸收系數(shù)法求算出樣品溶液的濃度。

光譜法(spectrometry)是基于物質(zhì)與電磁輻射作用時(shí),測(cè)量由物質(zhì)內(nèi)部發(fā)生量子化的能級(jí)之間的躍遷而產(chǎn)生的發(fā)射、吸收或散射輻射的波長和強(qiáng)度進(jìn)行分析的方法。光譜法可分為發(fā)射光譜法、吸收光譜法、散射光譜法;或分為原子光譜法和分子光譜法;或分為能級(jí)譜,電子、振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)光譜,電子自旋及核自旋譜等。

分光光度法是光譜法的重要組成部分,是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。常用的技術(shù)包括紫外-可見分光光度法、紅外分光光度法、熒光分光光度法和原子吸收分光光度法等。

物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。在一定條件下,物質(zhì)的吸收系數(shù)是恒定的,且與入射光的強(qiáng)度、吸收池厚度及樣品濃度無關(guān)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后,可用同樣條件將該供試品配成溶液,測(cè)定其吸光度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測(cè)定,故又稱之為比色分析。

蛋白質(zhì)與生命的起源、存在和進(jìn)化都密切相關(guān),蛋白質(zhì)測(cè)定涉及到生產(chǎn)和利研的眾多領(lǐng)域。本試驗(yàn)用紫外分光光度法進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測(cè)定,由此分析此方法的特點(diǎn)及適用條件。結(jié)果表明,紫外吸收法簡單、迅速,且相對(duì)較為準(zhǔn)確,是測(cè)定低濃度蛋白質(zhì)含量的有效方法。

蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)含有共軛雙鍵,因此,蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì),其最大吸收峰位于280nm附近(不同的蛋白質(zhì)吸收波長略有差別)。在最大吸收波長處,吸光度與蛋白質(zhì)溶液的濃度的關(guān)系服從朗伯-比耳定律。該測(cè)定法具有簡單靈敏快速高選擇性,且穩(wěn)定性好,干擾易消除不消耗樣品,低濃度的鹽類不干擾測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。

最后推薦一款可以應(yīng)用在紫外分光光度法中的紫外線傳感器,由工采網(wǎng)從國外引進(jìn)的告知紫外線傳感器 - GUVC-T10GD,該傳感器芯片大小0.4mm,TO 46封裝,使用鋁氮化鎵材料構(gòu)成,裝有肖特基光電二極管,具有光伏模式操作,有良好的日盲。廣泛應(yīng)用于:紫外線強(qiáng)度檢測(cè)和控制,UV指數(shù)檢測(cè)。戶外檢測(cè)UV指數(shù)設(shè)備等,還可以用于紫外線消毒和UV固化,用來監(jiān)測(cè)紫外線強(qiáng)度。UV火焰探測(cè)器等。



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